摘要:2.3抗衰老作用陈铸和边凌云等通过对D-半乳糖致衰老模型进行实验,发现巴戟天醇提物各剂量(2.1、0.7gkg-1)组均能减少跳台错误次数,增加水迷宫穿越次数。 ...
相关链接:盐,氮,总磷。
多糖的提取量随着乙醇浓度的增加而不断增大。(3)乙醇沉淀多糖中沉淀时间的优化乙醇沉淀多糖中在4℃条件下分别醇沉12h、24h、36h,测定胞外多糖的产量,如图7所示
EPS含量最后达到392.50mg/L,产量为原来的1.49倍。通过单因素实验及正交实验最终验证,发现当用浓度为60%三氯乙酸处理过发酵液后,在14000g离心力下离心40min除蛋白效果最佳。沉淀多糖的最优组合是3倍体积、浓度为100%的乙醇沉淀12h。(3)除蛋白质中离心时间的优化本实验中发酵液细胞分离后,加入50%的三氯乙酸溶液1/5体积,在16000g的离心力下分别离心10min、20min、30min、40min,选取最优化离心时间,如图4所示。最优化分离纯化工艺条件为:添加三氯乙酸60%(w/v)(12h)500r/min搅拌5min离心沉淀除蛋白(4℃,14000g,40min)上清加乙醇沉淀多糖(100%,3倍体积,4℃,处理12h)离心(12000g,30min)冷冻干燥沉淀温水溶解(稀释10倍)透析MD34(4℃,处理12h)。
三、结论本项目以筛选出的胞外多糖高产菌乳酸乳球菌乳亚种LL9为菌种,进行EPS提取纯化工艺条件研究。经实验验证工艺流程合理并可行。在当地相关负责人介绍情况的过程中,督察人员发现,这片计划种植苎麻的田地里竟淌着乳白色的液体,凑近后还能看见明显的白色油光阵阵泛起。
资料来源:中国环境网。有的废石开采依山倾倒,严重破坏生态环境。下沉督察之前,督察组就收到了一封反映新余兴林采石场砖窑厂的信访举报件,举报件中称:双林镇下院大队布里村新余兴林采石场砖窑厂,运输车辆压坏村内道路,粉尘污染严重。随即,江西省自然资源厅组织开展矿山开发整治专项行动,对全省露天开采矿山摸底排查。
师傅,麻烦往山上再开一点,我们去上面厂区看看。无独有偶,江西俊宜矿业有限公司石灰粉运输皮带未封闭,物料装卸车间粉尘无组织排放,车间四壁和顶棚堆积着的厚厚尘垢这样垂直式开采,后面恢复起来实在太难了。
在历经长期的无序开采后,新余市的重重青山被凿下了道道裂痕。面对绿水青山间的伤痕,新余市委市政府及相关权责部门又该何去何从,值得关注。时隔5天,4月22日,第二轮第三批中央生态环境保护督察再次集中通报了8个典型案例。一圈转下来,督察组发现,只开采未实施治理的矿山仍占多数。
可现如今,面对秀美青山千疮百孔、满目疮痍,狠不下心、迟迟未动,矿山修复整治便成一纸空文,无人问津。同时,强化监督管理,保证整治工作在2020年顺利完成。这就是通过验收的绿色矿山?督察人员决定再去看看另一家的情况。督察组的车刚开进新余市分宜县双林镇下院大队布里村,督察人员就被路边的景象惊住了。
在已经被封堵的厂区门口,督察人员发现,脚踩过的积水处也泛起了乳白色的液体。督察组想去检查一下扬尘自动监控的设备是否爆表,谁知走近一看发现,设备早已处于停用状态。
督察人员来到分宜县荣春采石场,一眼望去,垂直采掘面上基本看不到绿色植被,边坡也看不到挂网修复的痕迹。其中,江西省新余市矿山开采现状一经曝光,一片哗然。
废石堆放侵占村内耕地为探明杜仲叶中的降压和保肝活性成分,明确其药效物质。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) : 7.64 (1H, d, J = 2.4 Hz, H-2ʹ), 7.62 (1H, dd, J = 2.4, 8.4 Hz, H-6ʹ), 6.86 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-5ʹ), 6.35 (1H, s, H-8), 6.16 (1H, s, H-6), 5.50 (1H, d, J = 7.3 Hz, H-1ʹʹ), 4.76 (1H, d, J = 6.7 Hz, H-1ʹʹʹ)。以上数据与文献报道基本一致,鉴定化合物10为槲皮苷。e2695分析型高效液相色谱仪、2535制备型高效液相色谱仪(美国Waters公司)。化合物13:棕黄色固体 (甲醇),分子式为C21H20O9。
E874经Sephadex LH-20柱色谱分离,甲醇洗脱,得到6个流分E8741~E8746。E8(30 g)经聚酰胺开放柱色谱分离,乙醇-水(1:100100:0)洗脱,得到8个流分E81~E88。
由于杜仲叶显著的功效,日本将其开发成杜仲茶等功能饮料,风靡一时。以上数据与文献报道基本一致,鉴定化合物9为槲皮素。
化合物9:黄色固体(甲醇),分子式为C15H10O7。13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) : 181.7 (C-4), 164.1 (C-2), 163.7 (C-7), 161.4 (C-9), 161.1 (C-4ʹ), 157.3 (C-5), 128.4 (C-2ʹ, 6ʹ), 121.1 (C-1ʹ), 115.9 (C-3ʹ, 5ʹ), 103.7 (C-10), 102.8 (C-3), 98.8 (C-6), 93.9 (C-8)。
E6749(31.0 mg)经制备液相色谱分离,甲醇-水(55:45)洗脱,得到化合物1(10.0 mg)和2(14.0 mg)。13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) : 176.3 (C-4), 164.4 (C-7), 161.2 (C-9), 156.6 (C-5), 148.2 (C-4ʹ), 147.3 (C-2), 145.5 (C-3ʹ), 136.2 (C-3), 122.4 (C-1ʹ), 120.5 (C-6ʹ), 116.1 (C-5ʹ), 115.6 (C-2ʹ), 103.5 (C-10), 98.7 (C-6), 93.8 (C-8)。E675(550.0 mg)经Sephadex LH-20柱色谱分离,甲醇洗脱,得到10个流分E6750~E6759和化合物3(161.0 mg)。Sepacore型中压制备色谱(瑞士Buchi公司)。
3 结构鉴定化合物1:黄色固体粉末(甲醇),分子式为C15H12O6。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) : 12.69 (1H, s, OH-5), 7.81 (2H, d, J = 8.1 Hz, H-2ʹ, 6ʹ), 6.94 (2H, d, J = 8.1 Hz, H-3ʹ, 5ʹ), 6.48 (1H, s, H-8), 6.27 (1H, s, H-6), 5.35 (1H, s, H-1ʹʹ), 4.03 (1H, s, H-2ʹʹ), 3.51 (1H, dd, J = 8.8, 3.1 Hz, H-3ʹʹ), 3.16~3.22 (2H, m, H-4ʹʹ, 5ʹʹ), 0.84 (3H, d, J = 5.1 Hz, H-6ʹʹ)。
1H-NMR (400 MHz, CD3OD) : 8.07 (2H, d, J = 9.0 Hz, H-2ʹ, 6ʹ), 6.90 (2H, d, J = 9.0 Hz, H-3ʹ, 5ʹ), 6.38 (1H, d, J = 2.1 Hz, H-8), 6.17 (1H, d, J = 2.1 Hz, H-6)。1H-NMR (400 MHz, CD3OD) : 6.92 (1H, s, H-2ʹ), 6.79 (2H, s, H-5ʹ, 6ʹ), 5.89 (1H, s, H-8), 5.88 (1H, s, H-6), 5.27 (1H, dd, J = 1.8, 2.6 Hz, H-2), 3.06 (1H, dd, J = 17.1, 12.8 Hz, H-3), 3.06 (1H, dd, J = 17.1, 2.7 Hz, H-3)。
以上数据与文献报道一致,鉴定化合物12为葛根素。合并E6和E7为E67(8.0 g),经反相ODS开放柱色谱分离,甲醇-水(1:50100:0)梯度洗脱,得到10个流分E670~E679。
其中的流分E104(90.0 mg)经制备液相色谱分离,甲醇-水(40:60)洗脱,得到化合物11(6.0 mg)。化合物3:黄色固体 (甲醇),分子式为C15H10O6。B8-7经Sephadex LH-20柱色谱分离,甲醇洗脱,得到7个流分B8-7-1至B8-7-7,流分B8-7-5(105 mg)经制备液相分离,甲醇-水(30:70)洗脱,得到化合物12(16.1 mg)和13(8.0 mg)。本课题组前期对杜仲叶的化学成分进行了系统研究,并考察了其降压及保肝活性。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) : 12.96 (1H, s, 5-OH), 7.92 (2H, d, J = 8.7 Hz, H-2ʹ, H-6ʹ), 6.92 (2H, d, J = 8.7 Hz, H-3ʹ, H-5ʹ), 6.78 (1H, s, H-3), 6.48 (1H, d, J = 1.9 Hz, H-8), 6.19 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-6)。E87经硅胶柱色谱分离(4.6 g),二氯甲烷-甲醇(100:00:100)洗脱,得到6个流分E871~E876。
以上数据与文献报道基本一致,鉴定化合物6为紫云英苷。将乙醇溶液提取物浓缩至无醇味后,依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次。
化合物12:黄色固体(甲醇),分子式为C21H20O9。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) : 197.9 (C-4), 168.6 (C-8), 165.1 (C-6), 159.2 (C-4ʹ), 131.3 (C-1ʹ), 129.2 (C-2ʹ, 6ʹ), 116.5 (C-3ʹ, 5ʹ), 103.5 (C-10), 97.2 (C-7), 165.0 (C-5), 96.3 (C-9), 80.6 (C-2), 44.2 (C-3)。